Z-ATAD-FMK对癫痫持续状态后大鼠海马Caspase-12、3表达和神经元凋亡的影响

【作者】 娄鹏程； 焦颖； 林忠东； 叶秀云； 王海萍； 李光乾；

【机构】 温州医学院附属育英儿童医院神经内科； 浙江中医药大学附属杭州市第六医院； 杭州市儿童医院神经内科；

【摘要】 目的探讨caspase-12抑制剂(苄氧羰-丙氨酰-苏氨酸-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮Z-ATAD-FMK)对大鼠癫癎持续状态(Status epilepticus,SE)后海马caspase-12和caspase-3表达的变化及神经元细胞凋亡的影响。方法64只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组(A组,8只),DMSO对照组(B组,8只),SE组(C组),Z-ATAD-FMK预处理组(D组)。后两组又随机分为三亚组(即12h组、24h组、72h组,各8只)。采用氯化锂-匹罗卡品法制作SE大鼠模型,后三组均于造模前2h于右侧脑室内分别注入DMSO5ul,DMSO5ul,Z-ATAD-FMK5ul。采用免疫组化法检测大鼠海马caspase-1 2、caspase-3蛋白的表达变化;实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)检测海马组织caspase-3 mRNA的转录状况;TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡的变化。结果A组和B组大鼠海马CA1区均有少量caspase-12、caspase-3蛋白表达,但A组与B组之间无统计学意义;C组大鼠海马CA1区caspase-12、caspase-3蛋白表达在SE后12h开始增加,24h进一步升高,均于72h达最高点,且均较A、B组显著增高(P<0.01);D组24h、72h时间点caspase-12、caspase-3蛋白表达的动态变化与C组相似,但均较C组明显降低(P<0.05或P<0.01)。C组各时间点海马caspase-3 mRNA的表达量和TUNEL阳性细胞数均较A组、B组高(P<0.01),且随时间延长逐步增高,SE后72h达最高点;D组各时间点海马两者的表达明显低于C组(P<0.05或P<0.01)。结论Z-ATAD-FMK能选择性地阻断caspase-12的活性,并降低了caspase-3的表达;提示caspase-3可能是caspase-12的下游,SE后caspase-12/caspase-3凋亡通路可能参与了大鼠癫癎性脑损伤的发生发展过程。更多还原