氟他胺联合去雄激素环境诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立

【作者】 陶志华； 许刚； 陈兵华； 毛易捷； 何晶晶； 吴伟； 林晓梅； 陈占国； 周武； 沈默；

【机构】 浙江温州温州医学院附属第一医院实验诊断中心；

【摘要】 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型。方法将雄激素依赖的父代前列腺癌LNCaP细胞去雄激素培养5代后,加入终浓度为1.0×10-7mol/L的氟他胺培养20代,再提高氟他胺浓度到5.0×10-6mol/L,培养35代,并以此LMCaP细胞为实验组。雄激素长期培养的LNCaP细胞为对照组。采用CCK8法测定不同代数LNCaP细胞的增殖情况,流式细胞技术检测两组细胞的细胞周期变化和Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果第1、2、10代实验组LNCaP细胞在氟他胺浓度为5.0×10-6mol/L的去雄激素培养液中细胞生长率呈逐渐下降趋势;但至第30、50、60代时,其细胞生长率呈逐渐上升趋势,对照组LNCaP细胞在此培养液中连续培养20天后无法继续生长。在整个培养过程中实验组细胞形态发生了改变。氟他胺和去雄激素环境对实验组LNCaP细胞的细胞周期均无明显影响,而对照组LNCaP细胞的生长受氟他胺和去雄激素环境影响而抑制,且两者联合作用时其影响更为明显,表现为G0/G1期阻滞,S期和G2/M期均减少。实验组LNCaP细胞Bcl-2蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),而Bax蛋白两组间表达无明显差异(P>0.05)。结论成功建立了雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型,可模拟临床上前列腺癌雄激素去势后合并氟他胺治疗时由雄激素依赖转变为雄激素非依赖的过程,为今后相应的深入研究提供了理想的实验模型。更多还原