利用PCR产物直接测序技术分析温州籍β珠蛋白合成障碍性贫血患者的基因突变

【作者】 郑美琴； 李伟； 吕建新；

【机构】 温州医学院附属眼视光医院检验科； 温州医学院生命科学院；

【摘要】 目的分析经临床诊断的温州籍汉族人β珠蛋白合成障碍性贫血患者的血液学及分子生物学特性,测定其PCR产物序列并与标准序列进行比较,找出温州地区引起该病的主要致病突变位点和单核苷酸多态性,为今后对温州地区开展珠蛋白合成障碍性贫血人群遗传咨询、产前诊断和预防计划提供有价值的资料。方法对44例临床诊断的患者抽取静脉血(EDTA-K2抗凝)提取全血基因组DNA,采用PCR扩增,直接测定纯化后PCR产物序列,并与标准序列进行比对分析。根据测序峰图,对部分变异采用基因克隆技术证实。结果44例散发患者中发现9种基因突变类型,其中2个位点属于已经确认的单核苷酸多态性(exonl 59,IVS-2-665),3种属于中国人常见突变类型之列(IVS-2-654、CD41/42-TTCT和TATA box nt-28),2种属于少见类型异常血红蛋白(CD47、CD66,已经克隆证实),2种为新发现变异(-24A→T,CD26A→G同义突变,未见报道)。结论温州地区汉族人群珠蛋白基因突变情况较为复杂(共发现9种突变)。同国内外报道的正常人群相比,温州籍合成障碍性贫血患者单核苷酸多态性具有一定的特殊性:单核苷酸多态性位点显著减少,各位点的碱基频率也有不同。更多还原