快速高通量的非整体分子检测方法MLPA

【作者】 唐少华； 陈向南； 毛义建； 李德柒； 谢番妮； 谢丙乐； 吴昊； 林小琳； 沈旭娜； 徐峰；

【机构】 浙江省温州市第二人民医院检验科； 浙江省温州市第二人民医院妇产科；

【摘要】 目的评价MLPA技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification)在染色体非整体诊断中的应用价值,为我国羊水染色体诊断提供一种快速、特异、高通量的分子诊断方法。方法应用MLPA技术检测了150例羊水标本、50例外周血标本,所有标本均进行常规染色体培养,应用Coffalyser9.0MLPA-DATA数据分析软件获得MLPA结果,比对MLPA和染色体培养结果的准确性,评价两种技术的符合率,总结MLPA技术临床应用过程中的关键要点。结果MLPA扩增后探针信号强度与质控相比比率大于1.3判定为重复,小于0.7判定为缺失。150例羊水标本,MLPA显示非整倍体染色体数目异常14例,与羊水染色体培养核型分析结果相同;50例外周血标本,MLPA异常21例,与培养结果符合率100%。DNA质量和浓度是实验成败的关键,Coffalyser9.0MLPA-DATA数据分析软件可以实现MLPA数据处理通量化。结论MLPA技术用于染色体非整倍体数目检测快速、特异、敏感,解决了常规染色体培养周期长的问题,特别是对于大量的产前诊断羊水标本,可以实现高通量检测,临床应用价值高。更多还原