雌激素联合DNA去甲基化药物(5氮胞苷)在前列腺癌细胞22Rvl中上调p75NTR表达并诱导凋亡

【作者】 郁建迪； 杨凯； 毛琪琦； 孔德波； 郑祥毅； 谢立平；

【机构】 浙江大学医学院附属第一医院泌尿外科； 浙江医院泌尿外科；

【摘要】 目的探讨前列腺癌细胞中雌激素能否上调神经生长因子受体p75NTR的表达,进一步阐明雌激素治疗雄激素非依赖性前列腺癌的分子机制,提高雄激素非依赖性前列腺癌的治疗效果。方法培养人前列腺雄激素非依赖性细胞株22Rv1,分成四个实验组:1.)对照组;2.)单用雌激素组;3.)单用DNA去甲基化药物组;4.)联合应用雌激素及DNA去甲基化药物组。分别应用不同浓度的17-β-雌二醇及5氮胞苷处理22Rv1细胞。于药物作用后24小时、48小时、72小时,观察并记录细胞形态变化;MTT实验检测细胞生长增殖抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR、western-blotting实验检测雌激素受体ERα、ERβ,神经生长因子受体p75NTR、trkA基因表达情况的变化,另外通过western-blotting技术检测相应药物处理后核转录因子NF-κB蛋白在胞浆及胞核内分布改变来初步探讨药物作用后22Rv1细胞发生凋亡的机制。更多还原