【作者】 林景瑞； 陈晓辉； 王灵芝； 乔延江； 毕开顺；

【Author】 Lin Jingrui~1,Wang Linzhi~2,Qiao Yanjiang~2,Bi Kaishun~1 (1.School of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016,China; 2.School of Chinese Pharmacy,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100102,China)

【机构】 沈阳药科大学药学院； 北京中医药大学中药学院；

【摘要】 目的:建立反相高效液相（RP-HPLC）法测定5-脂氧合酶抑制剂活性。方法:采用Brava BDS C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-0.02%乙酸水,梯度洗脱（0～5 min,比例为22.2:77.8;5～8 min比例由22.2:77.8→15:85;8～18 min,比例为15:85）,流速为0.8 mL·min^-1;柱温为30℃;分别在235 nm和275 nm检测5-脂氧合酶的主要产物LTB₄和5-HETE。结果:LTB₄和5-HETE分别在0.02～0.20 mg·L^-1（r=0.9999）,0.05～0.50 mg·L^-1（r=1.0000）范围内呈良好的线性关系;回收率（n=6）分别为100.0%,97.7%及其RSD分别为1.08%和1.52%;日内、日间精密度的RSD分别为0.73%,1.05%和0.26%,1.26%。结论:该法分离效果和重复性均良好,结果准确可靠,可用于LTB₄和5-HETE的检测,同时也为5-脂氧合酶抑制剂活性测定提供了可靠的依据。更多还原

【Abstract】 Objective:To develop an efficient RP-HPLC method for 5-lipoxygenase（5-LOX） inhibitory activity.Method:The content of LTB4 and 5-HETE,the main products of 5-LOX pathway of arachidonic acid metabolism,was determinded by RP - HPLC method.RP - HPLC was performed on a Brava BDS C18 column（250 mm×4.6 mm,5 um） using a mobile phase consisting of 0.02%acetic acid solution - methanol（gradient elution:0～5 min,22.2:77.8;5～8 min,22.2:77.8→15:85;8～18 min,15:85） at 30℃with the flow rate of 0.8 mL·min^-1 and detection wavelength at 235 nm and 275 nm.Result:The calibration curve was linear in the range of 0.02-0.20mg·L^-1（r=0.9999） for determination of LTB₄,0.05- 0.50 mg·L^-1（r= 1.0000） for determination of 5-HETE.The average recoveries（n=6） of LTB⁴ and 5-HETE were 100.0%（RSD=1.08%） and 97.7%（RSD=1.52%）,respectively.The intra-day and inter-day RSDs were 0.73%,1.05%and 0.26%,1.26%.Conclusion:Being sensitive,accurate and reliable with good reproducibility,the method is available for the determination of 5-LOX inhibitory activity.更多还原