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PNPLA3 I148M肝脏特异表达质粒构建
【作者】 辛永宁； 姜曼； 林中华； 张丁丁； 耿宁； 宣世英；
【机构】 青岛市市立医院消化内二科； 青岛市消化疾病重点实验室； 中国海洋大学医药学院； 青岛大学医学院；
【摘要】 <正>目的构建PNPLA3 I148M肝脏特异表达质粒,并在细胞水平进行表达验证。方法根据NCBI上PNPLA3的已知序列,全基因合成PNPLA3基因的cDNA片段。利用PNPLA3的cDNA片段为模板,通过两轮PCR的点突变,构建出PNPLA3 I148M突变体,连接至表达载体,经转化、各挑选2个克隆、菌液培养和质粒抽提多步后,进行酶切验证,同时以野生型PNPLA3为阳性对照。提取C2C12细胞的基因组DNA,以其为模板,进行PCR扩增获取肝脏特异性表达启动子ALB,经PCR扩增将Enhancer-pro-
- 【会议录名称】 中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编
- 【会议名称】中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议
- 【会议时间】2013-06-20
- 【会议地点】中国云南昆明
- 【分类号】R363
- 【主办单位】中华医学会感染病学分会、中华医学会肝病学分会