活化NKT细胞在小鼠衣原体生殖道感染中作用的研究

【作者】 王红； 赵蕾； 彭莹； 刘娟； 齐眉； 陈强； 杨熙； 赵蔚明；

【机构】 山东大学医学院医学微生物学教研室； 加拿大曼尼托巴大学医学微生物系；

【摘要】 目的分析自然杀伤T(NKT)细胞在小鼠衣原体生殖道感染中的作用并初步探讨其作用机制。方法雌性BALB/c小鼠腹腔注射NKT细胞特异性刺激物α-galactosylceramide(α-半乳糖神经酰胺)或vehicle(溶媒对照)后阴道接种衣原体(C.muridarum)。不同时间点取小鼠阴道拭子检测衣原体存活数(IFU),同时对小鼠生殖道标本进行病理组织学分析。小鼠生殖道局部引流淋巴结NKT细胞用四聚体染色后,流式细胞术分析细胞的活化情况。利用RT-PCR方法对感染小鼠生殖道组织细胞因子的表达。ELISA检测生殖道引流淋巴结和生殖道冲洗液的细胞因子模式。结果与对照组小鼠相比,α-半乳糖神经酰胺处理组小鼠对衣原体感染体抗力较强,阴道衣原体IFU明显低于对照组存活数较低(P<0.05)。生殖道组织的肉眼及镜下观察发现α-半乳糖神经酰胺处理组小鼠较少发生子宫角扩张和输卵管积水;生殖道局部组织炎症病变较轻。流式检测结果表明,α-半乳糖神经酰胺处理组小鼠的NKT(CD1d tetramer+TCRβ+)细胞以及CD69+NKT细胞的比例较对照组明显增加。荧光定量PCR结果显示,实验组小鼠生殖道组织中IFN-γ和IL-12 mRNA表达水平升高,而IL-10水平下降,与小鼠生殖道引流淋巴结培养上清和生殖道冲洗液的ELISA结果一致。结论经α-半乳糖神经酰胺活化的NKT细胞对生殖道C.muridarum感染有保护性作用,其保护性作用的发挥与促进宿主抗衣原体生殖道感染的Th1免疫反应有关。更多还原