CD4+Foxp3+Treg细胞在幽门螺杆菌感染中作用的初步研究

【作者】 刘胜； 刘亚普； 陈超群； 蔡恒玲； 罗晶晶； 李翔； 张艳；

【机构】 南华大学病原生物学研究所；

【摘要】 目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染C57BL/6小鼠模型,综合分析CD4+Foxp3+Treg细胞及其相关细胞因子在H.pylori感染过程中的作用。方法构建H.pylori感染C57BL/6小鼠模型;流式细胞术分析对照组、感染组、治疗组小鼠胃组织固有层淋巴细胞(LPLs)和脾淋巴细胞中CD4+Foxp3+Treg细胞的百分比;用PBS(阴性对照)、H.pylori超声上清、PMA+Ionomycin+BFA(阳性对照)分别刺激培养的治疗组小鼠脾淋巴细胞,用流式细胞术分CD4+Foxp3+Treg的百分比;RT-PCR检测小鼠胃组织Foxp3的mRNA的表达;ELISA检测小鼠胃组织匀浆上清液和脾淋巴细胞抗原刺激培养上清中IL-10、IFN-γ和TGF-β1的含量;免疫组化检测Foxp3+Treg在小鼠胃组织中的分布及数量。结果感染组小鼠胃组织LPLs和脾淋巴细胞中CD+Foxp3+Treg细胞的百分比高于PBS组和治疗组(P<0.01);Hpylori超声上清刺激培养的脾淋巴细胞中,CD4+Foxp3+Treg细胞的百分比高于PBS对照组,低于阳性对照组(P<0.01);感染组小鼠胃组织高表达Foxp3 mRNA,而PBS组和治疗组几乎不表达;3组小鼠胃组织匀浆上清液中IL-10和IFN-γ含量无显著变化(P>0.05);H.pylori超声上清刺激培养的脾淋巴细胞上清液中,IL-10的含量高于PBS组和阳性对照组(P<0.01),TGF-β1的含量高于PBS组(P<0.05);感染组小鼠胃组织中Foxp3+Treg细胞数目高于PBS组和治疗组,且主要分布在胃黏膜下面的固有层(P<0.05)。结论 H.pylori感染引起感染部位CD4+Foxp3+Treg细胞数目增多,其百分比上升,Foxp3 mRNA表达增高,并伴随着H.pylori的根除而减少,CD4+Foxp3+Treg细胞与H.pylori感染密切相关;H.pylori超声抗原能有效刺激脾淋巴细胞向Treg细胞转变,并促进IL-10和TGF-β1的分泌。更多还原