Egr-1 siRNA对烟草烟雾刺激大鼠主动脉血管平滑肌细胞分泌白细胞介素-1 mRNA的影响

【作者】 刘雪莲； 郭洪涛； 刘闺男；

【机构】 中国医科大学附属第一医院心血管内科；

【摘要】 <正>目的探讨早期生长反应因子-1的小干扰RNA(Egr-1siRNA)对烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)刺激大鼠主动脉平滑肌细胞分泌IL-1 mRNA的影响。方法体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,用不同浓度CSE(0%、5%、10%、20%、40%)作用细胞,用Trizol Reagent提取细胞的总RNA,采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)试剂盒扩增目的片段,PCR产物电泳后,用嗅化乙淀染色,BioImaging Systems系统成像,用条带灰度来表示产物的表达量,GAPDH条带灰度作为参照量,观察IL-1beta mRNA的表达,筛选出对细胞刺激效果最明显的CSE浓度;用上一步实验筛选出的最佳浓更多还原