强脉冲光对成纤维细胞分泌TGF-β1的影响及信号机制研究

【作者】 于小峰； 鲁建云； 黄进华； 陈静； 左成忻； 向亚平； 杨盛波； 谭丽娜； 耿雪瑞； 罗翔； 康健；

【机构】 中南大学湘雅三医院皮肤科；

【摘要】 目的研究强脉冲光(intense pulsed light,IPL)照射对皮肤成纤维细胞分泌TGF-β1的影响及信号机制。方法分离培养皮肤原代成纤维细胞。然后,将成纤维细胞分为两组试验:一组为IPL治疗组,用能量密度分别为0 J/cm~2(阴性对照)、10 J/cm~2、18 J/cm~2、27 J/cm~2、36 J/cm~2和36 J/cm~2×2(能量密度为36J/cm~2的IPL照射两次)的IPL照射,采用Elisa法检测细胞培养上清液(cultural supernatants,CS)中TGF-β1的含量,Western印迹法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和p38的磷酸化;另一组为IPL+抑制剂组,包括IPL(对照),IPL+SP600125,IPL+SB203580(P38抑制剂),在加入抑制剂2 h后,均用能量密度为36 J/cm~2的IPL照射,采用Elisa法检测细胞培养上清液(cultural supernatants,CS)中TGF-β1的含量。结果 IPL照射后,IPL治疗组CS中TGF-β1的浓度在10 J/cm~2、18 J/cm~2、27 J/cm~2、36J/cm~2分别与阴性对照组相比较均减少(P<0.05),而在36 J/cm~2×2时与阴性对照相比较增高(P<0.05);IPL治疗组中JNK和P38可被激活,随剂量增加,先增强后减弱,而都在10 J/cm~2表达最强。IPL+抑制剂组CS中TGF-β1的含量在IPL+SP600125与对照相比较减少(P<0.05);在IPL+SB203580与对照(20.50±0.56)pg/mL相比有明显增多(P<0.05)。结论强脉冲光在较低能量密度(≤36J/cm~2)时抑制皮肤成纤维细胞TGF-β1的分泌,较高能量密度(36 J/cm~2×2)时能促进TGF-β1的分泌;蛋白激酶JNK、p38在IPL影响TGF-β1的分泌过程中可能起着重要作用,其中JNK促进其分泌,而P38抑制其分泌。更多还原