巢式PCR检测人乳头瘤病毒的方法学建立及初步临床应用

【作者】 王瑜敏； 陶志华； 陈占国； 周武； 何晶晶；

【机构】 温州医学院附属第一医院实验诊断中心；

【摘要】 目的建立巢式PCR检测人乳头瘤病毒的方法学及作初步临床应用。方法以MY09/MY11为外引物,GP5+/GP6+为内引物建立巢式PCR,优化体系,评价其特异性和灵敏度,同时检测了54例HPV DNA阳性、4例弱阳性、42例阴性的标本,与基因导流杂交法作一致比较。结果检测到单一目的片断;最低能检测到1:16384稀释的HPV18阳性对照品,明显高于MY09/MY11方法;巢式PCR法检测到60例HPV DNA阳性标本,40例HPV DNA阴性的标本,与基因导流杂交法具有较好的一致性(x~2=39.518,P<0.001;Kappa=0.628,P<0.001)。结论所建立的巢式PCR具有较好的特异性和灵敏度,与基因导流杂交法具有较好一致性。更多还原