基因修饰CD20-scFv-IgGFc-CD28-ζ T细胞靶向杀伤Raji细胞凋亡的研究

【作者】 谭映霞； 俞康； 胡永仙； 章圣辉； 韩义香； 高申孟； 吴建波；

【机构】 温州医学院附属第一医院；

【摘要】 目的:将重组的CD20-scFv-IgGFc-CD28-ζ和CD20-scFv-IgGFc pLNCX质粒分别转染入T淋巴细胞中去杀伤Raji细胞,观察基因修饰的T细胞分泌IFNγ的能力和诱导Raji细胞IL-10和Bcl-2的变化。方法:将重组质粒转染至PA317细胞中,用重组的PA317上清液感染外周血T淋巴细胞,用800ug/ml的G418筛选一周后的T细胞去杀伤Raji细胞,分别在不同时间点检测Raji细胞Bcl-2的阳性率,用ELISA检测细胞因子IL-10、IFNγ。结果:Raji细胞Bcl-2的阳性率在24小时内就有明显下降,72小时内由98.43%下降到38.45%,下降幅度明显高于对照组和空白组。72小时检测IL-10发现实验组为100.3pg/ml,明显低于对照组的210.88pg/ml和空白组286.71pg/ml,同时IFNγ为1487.23 pg/ml,其分泌量也显著高于对照组。结论:①CD20基因修饰的T细胞能快速诱导细胞的凋亡。②该凋亡途径可以通过抑制Raji细胞的IL-10表达而抑制Bcl-2的表达从而加速Raji细胞的凋亡。③CD28和ζ的在T细胞活化过程中扮演重要角色,可促进T细胞分泌IFNγ,增强了CD20特异T细胞杀伤Raji细胞的能力。更多还原