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猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化
【机构】 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室,甘肃省新兽药工程重点实验室； 中国农业科学院兰州兽医研究所； 甘肃农业大学动物医学院；
【摘要】 目的为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,试验克隆了衣壳蛋白基因CP239片段,并研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果成功克隆获得了衣壳蛋白基因CP239片段,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为0.3m mol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为45.3ku;Western-blot结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达。
【基金】 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目编号:BRF090402
- 【会议录名称】 第3届全国人畜共患病学术研讨会论文集
- 【会议名称】第3届全国人畜共患病学术研讨会
- 【会议时间】2011-09-01
- 【会议地点】中国北京
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国科学技术协会