河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究

【作者】 曹月龙； 韦宋谱； 丁道芳； 王学宗； 庞坚； 郑昱新； 徐勤光； 詹红生；

【机构】 上海中医药大学附属曙光医院骨伤科；

【摘要】 目的:探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A(Anodontaglucan HBP-A)对体外软骨细胞wnt通路的调控作用。方法:体外培养大鼠软骨细胞,添加IL-1β(10ng/m1)诱导分化,分为空白组,IL-1β组,IL-1β+IWP-2(5μM,Wnt通路抑制剂)组,IL-1β+HBP-A(0.3mg/ml)组,IL-1β+IWP-2+HBP-A共5组培养,提取各组细胞RNA和蛋白,采用Rt-PCR检测各组细胞Wnt-3a、β-catenin(24h、48h、72h)及MMP-13(72h)基因的表达;采用Western-blot检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和coll-Ⅱ蛋白的表达(48h)。结果:细胞在IL-1β诱导下分化,出现Wnt-3a、β-catenin以及MMP-13基因表达升高,β-catenin和MMP-13蛋白表达升高,Sox-9和coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a、β-catenin以及MMP-13基因的高表达,抑制β-catenin和MMP-13蛋白的高表达,上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。当IWP-2和HBP-A合用时,Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低,Sox-9蛋白表达最高。结论:HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达,延缓软骨细胞分化,并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin、Sox-9因子的表达。更多还原