MRI评价腺病毒介导的酪氨酸酶基因在HepG2细胞表达的实验研究

【作者】 元建鹏； 邓贺然； 刘壮盛； 钟镜联；

【机构】 广东中山大学附属第二医院放射科；

【摘要】 目的以酪氨酸酶基因腺病毒重组体转染HepG2细胞,利用其合成大量黑色素而能被MRI检测的特性来反映基因表达的情况,观察酪氨酸酶基因腺病毒重组体转染体外细胞的效果。方法以不同数量酪氨酸酶基因腺病毒重组体转染HepG2细胞,以MRI T₁WI、T₂WI、STIR序列扫描转染细胞,观察表达的黑色素的MRI信号。应用Fontana染色检测黑色素的合成,Real-Time PCR检测酪氨酸酶基因的cDNA片段,以进一步验证酪氨酸酶基因的转染与表达。结果 1.酪氨酸酶基因腺病毒重组体转染HepG2细胞并在其中表达生成黑色素,经转染复数（MOI）分别为50、150、300的重组腺病毒转染的10⁶个细胞内生成的黑色素能够被MRI检测到并在MRI T₁WI、T₂WI、STIR检查呈高信号。2.Fontana染色法检测到转染的HepG2细胞内的黑色素颗粒;3.采用Real-Time PCR方法检测到转染的Hepg2细胞含酪氨酸酶基因的cDNA片段。结论 MRI能够检测到HepG2细胞内由外源基因表达合成的黑色素,说明腺病毒作为运送载体可以有效地运送酪氨酸酶基因进入HepG2细胞。更多还原