人循环成纤维细胞参与皮肤创伤修复的作用

【作者】 胡刚； 冯捷； 金岩；

【机构】 西安交通大学第二医院皮肤科； 第四军医大学口腔医学院组织工程中心；

【摘要】 循环成纤维细胞(Circulating fibrocyte,CF)是存在于外周血,属于造血组织来源,具有多向分化潜能的一类干细胞,能够在创伤愈合过程中检测到,但其参与创伤修复的作用机制仍不明确。为了研究CF参与皮肤创伤修复的具体机制,我们应用密度梯度离心法从人外周血中分离得到成纤维样、贴壁生长的细胞亚群,流式细胞仪检测CD11b、CD14、CD34、CD44、CD45、CD90细胞表面分子和Collagen I的表达,进行成脂、成骨诱导分析多向分化潜能;应用Hoechst-33342荧光染料进行细胞标记后,移植预先经放射线照射破坏骨髓的裸鼠皮肤创伤模型,分别于移植后3天、7天、14天和21天取创伤愈合组织活检,进行冰冻连续切片,倒置荧光显微镜观察荧光表达情况,与HE染色进行对照,并应用免疫组织化学方法检测Ⅷ因子、α-SMA、pan-CK和Collagen I标志性蛋白的表达。结果分离得到的成纤维样细胞表达CD11b、CD14、CD34、CD45、CD90和Collagen I,成脂、成骨诱导后经油红和茜素红染色为阳性,移植后在经放射线破坏骨髓的裸鼠模型皮肤创伤愈合组织中检测到密集的蓝色荧光表达,与HE染色切片能够进行结构重叠,标志性蛋白染色结果为Ⅷ因子和pan-CK阴性,α-SMA和Collagen I为阳性。结果证明CF细胞表达造血干细胞标志,属于造血组织来源,且能够向脂肪和骨组织分化,是一类存在于循环血的干细胞;移植后能够在创伤组织中存活,并分化为肌成纤维细胞分泌α-SMA,参与创面收缩,以及分化为真皮成纤维细胞,分泌细胞外基质I型胶原,以达到促进皮肤创伤修复的作用。因此,CF是能够促进皮肤创伤愈合的循环干细胞,它通过分化为肌成纤维细胞和真皮成纤维细胞参与皮肤创伤修复过程。更多还原