应用分子生物学方法诊断罕见遗传性皮肤病病

【作者】 林志淼； 张峰； 王明悦； 刘强； 马志红； 杨勇； 李若瑜； 朱学骏；

【机构】 北京大学第一医院皮肤科； 中科院北京基因组研究所； 河北医科大学第二医院皮肤科；

【摘要】 目的采用现代分子生物学方法明确一个罕见遗传病性皮肤病家系的临床诊断。方法采集一个诊断未明的罕见遗传病大家系的临床资料、外周血及皮肤标本。对皮肤标本进行特殊染色及透射电镜检查。提取家系成员外周血DNA,首先筛查并排除几个可疑的已知疾病致病基因的突变,进而利用Illumina含6000个SNP标记的基因芯片进行连锁分析,确定与疾病连锁的染色体区段,分析该区段的可疑致病基因,最终通过PCR-DNA测序的方法确定致病基因突变位点,明确该疾病的最终诊断,并对家系的临床表现进行重新评价及总结。结果在该家系中共搜集到4代21名成员的临床资料及外周血标本,以及2名患者的皮肤组织。通过对患者的临床表现以及皮损的组织学和超微结构特点分析,发现该疾病与数种遗传性疾病类似,但均非完全一致。对以上遗传病的致病基因进行了检测并排除了这几种诊断。全基因组连锁分析显示,4号染色体端粒到rs934498之间的区域LOD值大于4.0,提示肯定连锁,该区段包含90个已知基因。经综合分析患者的临床和组织学特点,考虑该区域中成纤维生长因子受体3(FGFR3)基因缺陷的可能性最大。最终通过PCR-DNA测序确定了FGFR3基因的致病突变p.Lys650Thr,从而确定该疾病为家族性黑棘皮病。根据FGFR3突变可以引起软骨发育不良的特点,进一步对家系患者进行调查,发现部分患者(并非所有)存在身材矮小现象以及皮损与经典型黑棘皮病的区别。结论本研究运用分子生物学的方法确定了一个罕见的遗传性疾病的诊断,发现了国内首例家族性黑棘皮病。现代分子生物学方法可以作为明确罕见遗传病诊断的重要辅助手段,提高临床工作的质量。更多还原