改良系列酶消化法在人椎间盘髓核细胞培养中的应用

【作者】 冯旭； 陈安民； 孙正义； 黄建明； 刘莉；

【机构】 复旦大学附属华山医院南汇分院骨科； 华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科； 兰州大学附属第二医院骨科研究所；

【摘要】 目的:通过Ⅰ型和Ⅱ型胶原酶在不同浓度下消化能力的比较,探讨适合于髓核细胞分离培养的消化酶和浓度。方法:椎间盘髓核组织剪碎,分成2大组:分别用胰蛋白酶+胶原酶Ⅰ型(A组)、胰蛋白酶+胶原酶Ⅱ型(B组)消化,各大组根据不同浓度分别为0.2%,0.1%和0.02%,在消化2,4,8,24,48,72h时在倒置显微镜下计算髓核细胞数,台盼蓝染色检查其活力。结果:各组在相同时间点、相同浓度下比较,Ⅱ组细胞数多于Ⅰ组,48h后3组细胞数无明显差异,0.02%Ⅱ型胶原酶消化组细胞活力较其他两组高。结论:极低浓度Ⅱ型胶原酶消化法不仅可以节省酶量,而且对髓核细胞的损伤小,适于髓核细胞消化培养。更多还原