人工抗原呈递细胞对HepG2.2.15细胞的HBV抑制作用

【作者】 唐翠兰； 陈智； 施维群；

【机构】 浙江中医药大学附属第二医院肝病科； 浙江大学医学院传染病国家重点实验室；

【摘要】 目的:本研究旨在以非抗原特异性人工抗原呈递细胞（artif icial antigen presenting cells,AAPCs）体外模拟树突状细胞生物学功能,探讨诱导T淋巴细胞活化、增殖的作用,以及活化后的T细胞对HepG2.2.15细胞的HBV抑制作用。方法:采集正常成人（抗-HBs阳性）外周静脉血10ml并分离单个核细胞,并用磁珠筛选出CD⁴⁺T细胞,以负载抗-CD3、抗-CD28分子的磁性微珠为AA PCs,体外诱导CD⁴⁺T细胞活化、增殖。并将活化后的CD⁴⁺T细胞以一定比例（100:1,75:1,50:1,20:1,10:1,5:1以及1:1）与HepG2.2.15细胞共培养,观察活化后的T细胞对HepG2.2.15细胞的HBV抑制作用。结果:负载抗-CD3、抗-CD28分子的磁性微珠在体外可有效活化CD⁴⁺T细胞,在10天内CD⁴⁺T细胞可扩增1000倍以上。活化的CD⁴⁺T细胞以100:1,75:1,50:1比例与HepG2.2.15细胞共培养,在培养的第一天即可杀死全部HepG2.2.15细胞。活化的CD⁴⁺T细胞以20:1以及10:1比例与HepG2.2.15细胞共培养,可明显抑制HBeAg的分泌,并降低HBV DNA的滴度。但以5:1以及1:1共培养中,未发现明显的抑制HBV作用。结论:非抗原特异性人工抗原呈递细胞在体外能模拟人体抗原呈递细胞,刺激CD⁴⁺T特异性淋巴细胞活化、增殖。活化后的T细胞以10:1及以上比例与HepG2.2.15细胞共培养,对HepG2.2.15细胞的HBV有显著的抑制作用。更多还原