凋亡素体外诱导高表达Survivin膀胱癌细胞株凋亡效果观察

【作者】 詹辉； 王剑松； 严勇； 王春晖； 袁顺辉； 左毅刚； 柯昌兴； 丁明霞； 颜汝平；

【机构】 昆明医学院第二附属医院泌尿外科云南省泌尿外科研究所；

【摘要】 目的:观察凋亡素对高表达Survivin膀胱癌细胞株的作用效果,并探讨其临床意义。方法:利用免疫组织化学法检测膀胱癌细胞株BIU-87中Survivin的表达水平。分为单纯细胞组、转染空质粒pCDNA3组及转染pCDNA3/Apoptin组三组,利用脂质体转染法将真核表达载体pCDNA3/Apoptin及pCDNA3空质粒转染入膀胱癌细胞株BIU-87,并于转染后24小时通过RT-PCR法检测细胞中Apoptin的表达情况。分别于转染后24、48、72小时利用MTT法检测各组细胞存活率,并利用流式细胞仪TUNEL法检测各组细胞的凋亡率。结果:利用免疫组织化学法检测发现膀胱癌细胞株BIU-87中Survivin呈高表达状态,平均每个高倍镜视野中阳性细胞比例约70%,并有较多细胞呈现高表达状态。转染后24小时通过RT-PCR法可见Apoptin在膀胱癌细胞中表达。分别于转染后24、48、72小时利用MTT法检测各组细胞存活率,发现转染pCDNA3/Apoptin组肿瘤细胞存活率均明显低于对照组,差别有统计学意义(P<0.05);利用流式细胞仪TUNEL法检测各组细胞的凋亡率,发现转染pCDNA3/Apoptin组肿瘤细胞凋亡率均明显高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:凋亡素可在体外诱导高表达Survivin的膀胱癌细胞株BIU-87高效凋亡,结合相关机制表明凋亡素可在一定程度上克服Survivin的抗凋亡作用,因此有可能成为Survivin拮抗的抗肿瘤药物的协同用药选择。更多还原