内质网应激在脑缺血复灌中的作用研究

【作者】 袁扬； 张翔南； 陈忠；

【机构】 浙江大学药学院药理学系卫生部医学神经生物学重点实验室；

【摘要】 目的内质网是细胞内重要的细胞器,脑缺血过程中伴随着内质网应激,然而其在脑缺血复灌过程中的作用尚不明确。方法本实验采用小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型和大鼠皮质原代神经元氧糖剥夺（OGD）模型,以tunicamycin（TM）和thapsigargin（TG）作为内质网应激的激动剂,4-PBA Salt和Salubrinal作为内质网应激抑制剂。MCAO 1 h血流复灌时侧脑室给予不同剂量的TM（3μg,6μg）和TG（0.02μg,0.06μg）,对照组注射相同体积人工脑脊液,24 h后分别以TTC染色方法和18氟-脱氧葡萄糖microPET影像学技术检测小鼠脑梗死体积及代谢功能,记录神经行为学症状并评分。在体外培养8 d的大鼠皮质神经元OGD模型中,对神经元OGD 2 h,于复糖复氧时孵育各浓度TM(0.04～1 ng·L^-1),TG(0.08～2 nmol·L^-1)和4-PBA Salt(6～150 nmol·L^-1),Salubrinal(0.2～5 nmol·L^-1),复灌24 h后以TUNEL和MTT方法分别检测细胞凋亡和细胞活力。结果与MCAO手术对照组相比,TG,TM可剂量依赖地减少脑梗死体积,缓解脑缺血引起的葡萄糖代谢降低并改善神经行为学症状。神经元OGD复灌模型中,TM(0.2～1 ng·L^-1)和TG(0.08～2 nmol·L^-1)均可浓度依赖地减少OGD引起的细胞凋亡,而4-PBA Salt(6～150 nmol·L^-1)和Salubrinal(1 nmol·L^-1)均可显著提高OGD引起的细胞凋亡数及细胞活力降低。结论在脑缺血复灌过程中,内质网应激可能发挥了重要的神经保护作用。更多还原