丹参酮类药物体内代谢产物的LC-DAD-MS鉴定

【作者】 戴海学； 汪明明； 李晓蓉； 李宇航； 王丽娟； 薛明；

【机构】 首都医科大学化学生物学与药学院药理系；

【摘要】 目的:丹参酮是从我国传统名贵中药丹参中分离提取的一类具有多种药理活性并具有较新结构的丹参二萜醌类化合物,主要代表成分为隐丹参酮,丹参酮ⅡA,丹参酮Ⅰ和二氢丹参酮Ⅰ。丹参酮具有抗菌消炎、抗自由基抗脂质过氧化、抗肿瘤、抑制内皮细胞产生内皮素-1以及诱导细胞的分化等多种药理学活性。本研究采用LC-DAD-ESI-MSn方法系统鉴定了隐丹参酮,丹参酮ⅡA,二氢丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅰ四个主要活性代表成分在大鼠体内外的Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物。方法:（1）采用电子轰击质谱（EI-MS）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）分析技术并借助Mass Frontier软件对隐丹参酮、丹参酮ⅡA及丹参酮Ⅰ进行了结构及其裂解途径研究,分析其主要特征碎片离子的质谱特征与结构信息及其裂解途径,同时比较了EI源、ESI源裂解特征。结果:丹参酮ⅡA与隐丹参酮结构基本相同,差异主要在D环-呋喃环,因此二者的ESI裂解规律基本相同,主要裂解碎片均相差2个质子,主要裂解途径及其机制均相同,均通过丢失-H₂O、-CO、-CH3而发生裂解;二者EI源裂解所产生的小分子碎片也相同。丹参酮Ⅰ在ESI源的裂解途径上与丹参酮ⅡA和隐丹参酮存在着一些差异,但裂解规律比较相似,主要通过丢失-H₂O、-CO、-CH3而发生裂解。EI源裂解所产生的分子碎片与ESI源裂解碎片的相差较大。（2）隐丹参酮和丹参酮ⅡA经过大鼠体内外的生物转化后,可鉴定出19个Ⅰ相代谢产物和6个Ⅱ相结合产物,其中Ⅰ相产物中18个代谢产物与体外一致。丹参酮Ⅰ和二氢丹参酮Ⅰ经过大鼠体内转化后,可鉴定出16个Ⅰ相代谢产物和4个Ⅱ相结合产物。（3）丹参酮的代谢途径主要有两条:①发生在丹参酮原药上的羟基化、脱氢化、氧化反应和呋喃环裂解;②丹参酮先代谢成脱氢丹参酮后,再在其分子上进行羟基化、甲氧基化、氧化以及呋喃环裂解。Ⅱ相结合反应主要形成葡萄糖醛酸和硫酸结合产物。同时分析了这些代谢产物可能的转化途径。结论:结果为研究丹参二萜醌类活性成分的生物转化与结构修饰提供了重要依据。更多还原