前列腺疾病系列实验动物模型的创建与替代研究

【作者】 孙祖越； 吴建辉； 刘向云； 闫晗； 谢琛静； 潘琦； 王玖玖；

【机构】 上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室,中国生育调节药物毒理检测中心；

【摘要】 目的建立并完善前列腺疾病(前列腺增生、前列腺癌和前列腺炎)系列动物模型,同时在体外建立可以替代的生物学模型,为开展药效学和毒理学提供服务。方法(1)建立并完善研究团队的组织建设、管理制度和标准操作规程(SOP);(2)建立并完善前列腺疾病动物模型及其评价体系,包括一种前列腺癌转移模型、两种前列腺炎模型、三种前列腺增生模型和四种人前列腺癌细胞的裸鼠原位模型;(3)创建并完善前列腺疾病药物临床前评价体外替代模型体系,包括前列腺癌、前列腺炎和前列腺增生各两种模型。结果(1)建立了一支由5位博士、4位硕士、7位学士和14位本科以下,共30位科技人员组成的前列腺疾病临床前研究专业队伍;(2)制订了包括管理手册、业务手册、实验手册和质量保证这4部分在内的管理制度和标准操作规程〈SOP〉共计568条;(3)规范化地建立并完善了前列腺疾病动物模型及其评价体系,具体包括一种前列腺癌转移模型〈PC-3M细胞前列腺癌转移模型〉、两种前列腺炎模型〈前列腺组织蛋白结合免疫佐剂法诱导的大鼠免疫性前列腺炎模型和大鼠雌激素诱导的大鼠前列腺炎模型〉、三种前列腺增生模型〈丙酸睾丸素引起大白鼠前列腺增生法、老年犬自发性前列腺增生模型和丙睾法诱导Beagle犬前列腺增生模型〉和四种人前列腺癌细胞的裸鼠原位模型〈PC-3、DU145、LNCaP和CWR22Rv1癌细胞裸鼠原位模型〉;(4)规范化的建立并完善了前列腺疾病药物临床前评价体外替代模型体系,具体包括2种前列腺增生体外替代模型〈甾体5α-还原酶抑制剂体外筛选模型和人良性前列腺增生组织原代培养细胞体外筛选模型〉、2种前列腺癌体外替代模型〈PC-3、PC-3M、DU145、LNCaP及CWR22Rv1前列腺癌体外筛药模型和PC-3M侵袭小室前列腺癌体外浸润筛药模型〉和2种前列腺炎体外替代模型〈细菌脂多糖诱导的上皮细胞前列腺炎炎症模型和过敏异体蛋白(蛇毒)诱导的大鼠前列腺腺体上皮细胞前列腺炎体外免疫型模型〉;(5)我们将所有的替代模型和相应的动物模型作了一一比对,确定了这些模型的可替代性;(6)其中上述丙睾法诱导Beagle犬前列腺增生、甾体5α-还原酶抑制剂体外筛选、PC-3M细胞前列腺癌转移模型和PC-3M侵袭小室前列腺癌体外浸润筛药这三种模型是我们创建的模型。结论为了向前列腺药理毒理学研究提供足够的模型,我们规范地建立并完善了前列腺疾病动物模型及其评价体系;为了贯彻执行实验动物福利与"3R"原则,我们规范地建立并完善了前列腺疾病药物临床前评价体外替代模型体系。我们将替代模型和实验动物模型作了一一比对,结果验证了替代模型的成功。更多还原