抗肿瘤药物槐定碱对心脏毒性的研究

【作者】 谷东方； 李宝馨； 杨宝峰；

【机构】 哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地；

【摘要】 目的:许多具有抗心律失常作用的药物通过抑制HERG通道延长APD发挥作用,但过度抑制可引起LQT导致致命性心律失常Tdp,因此HERG通道是评价药物安全性的重要靶点。本研究通过抗肿瘤药物槐定碱对HERG钾通道电生理、动力学及蛋白转运表达的影响,发现其发挥抗心律失常作用的分子机制,进而探讨其对心脏的毒性。方法:（1）采用全细胞膜片钳技术在稳定的表达HERG基因的HEK293细胞中,研究槐定碱对HERG电流和HERG通道动力学的影响;（2）采用Western blot和细胞免疫荧光染色等分子生物学实验技术,研究槐定碱对HERG通道蛋白表达的影响。结果:（1）槐定碱浓度依赖性地抑制HERG时间依赖性电流(I_step)及HERG尾电流(I_tail)。在0mV,10,30,100和300μmol/L槐定碱对最大尾电流的抑制率分别为5.4±2.3%（P>0.05）,16.3±2.6%（P>0.05）,29.3±2.1%（P>0.05）和41.9±2.0%（P<0.01）,槐定碱的IC₅₀大于300μmol/L。（2）300μmol/L槐果碱使HERG通道稳态激活曲线左移,V_1/2显著性变化（给药前,-17.2±0.6 mV;给药后,-22.7±0.9 mV;P<0.05）。（3）300μmol/L槐定碱没有显著性意义改变稳态失活特性（P>0.05）。（4）在-30 mV～+30 mV电压下,300μmol/L槐定碱都使瞬时失活时间常数明显减小,失活速度加快。-30 mV下,给药前τ=14.2±0.5 ms,给药后τ=9.3±0.3 ms（P<0.001）。（5）在-60 mV～-20 mV电压下,300μmol/L槐定碱都使去活化时间常数明显减小,去活化速度加快。-60 mV下,给药前τ=4.0±0.3 ms,给药后τ=2.3±0.1 ms（P<0.01）。（6）槐定碱（30,100和300μmol/L）处理48 h后,对HERG通道蛋白表达没有影响（P>0.05）。结论:槐定碱对HERG通道的抑制作用是其发挥抗心律失常作用之一;槐定碱与HERG通道开放/失活状态都能结和,但对开放状态亲和力较强,可引起LQT,有发生心脏毒性的危险;槐定碱不通过HERG通道蛋白转运障碍而影响药物的使用安全。更多还原