cdkn1b表达水平作为预测肿瘤细胞对雷帕霉素类似物敏感性的标记物

【作者】 陈光； 郑思远； 李亦学； 蒙凌华； 丁健；

【机构】 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院； 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室； 中国科学院上海生命科学研究院生物信息中心；

【摘要】 目的评价cdknlb作为衡量肿瘤细胞对雷帕霉素类似物抗肿瘤作用敏感性生物标记物的可行性。方法从NCI的数据库中得到雷帕霉素及其类似物CCI-779对NCI60个细胞株增殖抑制的GI50数据,以及60个细胞株基因基础表达水平的数据,对二者进行相关性的统计学分析,找到可能与雷帕霉素类似物增殖抑制活性高度相关的候选基因。并对各种组织来源的细胞株进行候选基因表达水平及对雷帕霉素敏感性的检测,证实上述相关性的可信性。通过siRNA干扰方法调节候选基因在细胞中的表达水平,检测基因表达量对雷帕霉素增殖抑制及周期阻滞活性的影响。结果从NCI数据库中检索分析发现cdknlb基因表达水平与雷帕霉素类似物抗肿瘤活性呈高度相关。接下来试验选用MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-435、ZR-75-30、T47D、BT74、BT-549八株乳腺癌细胞对上述相似性分析结果进行了验证,结果显示MCF-7、ZR-75-30、T47D、BT74细胞cdknlb表达量在mRNA和蛋白水平均明显高于MDA-MB-231、MDA-MB-468 MDA-MB-435、BT-549细胞:SRB试验中,雷帕霉素对cdknlb的表达水平较高的MCF-7、T47D、BT74细胞体外增殖抑制活性高于其对MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-435、BT549等cdknlb表达水平低细胞的抑制率;流式细胞术检测细胞周期分布试验中,雷帕霉素诱导细胞G₁期阻滞作用亦与细胞cdknlb基础表达水平呈一定的相关性。此外,siRNA干扰方法下调cdknlb的表达可显著降低雷帕霉素对MCF-7细胞的增殖抑制作用和诱导周期阻滞作用。结论cdknlb的表达水平在一定程度上可作为衡量肿瘤细胞对雷帕霉素类似物抗肿瘤作用敏感性的标记物。更多还原