转录因子AP-2对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响

【作者】 张梦杰； 祝建； 廖雅成； 孙明； 李风知；

【机构】 同济大学生命科学与技术学院； 同济大学生命科学与技术学院模式生物技术开放实验室； Department of Pharmacology and Therapeutics,Roswell Park Cancer Institute,Buffalo,NY,USA；

【摘要】 核转录因子AP-2是一个重要的转录因子家族,该家族成员主要参与哺乳动物的胚胎发育、细胞分化、细胞周期调控等过程。腺病毒(Adenovirus,Ad)表达载体在哺乳动物和多种细胞上能够高效地进行基因转移和蛋白表达,使其在基因疫苗及基因治疗的研究中备受人们的青睐。我们利用pAdTrack-CMV/pAdEasy-1腺病毒系统,成功构建了含有目的基因AP-2的腺病毒表达载体pAdEasy-1/AP-2,PacI酶切线性化后将其转染到HEK293细胞中进行包装,获得含有AP-2的重组腺病毒。将收获的腺病毒感染不表达AP-2的恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞,western检测到AP-2在MDA-MB-231肿瘤细胞中重新表达。AP-2重组腺病毒感染MDA-MB-231细胞48h后,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况,软琼脂集落形成实验确定AP-2对癌细胞集落形成的影响,以及细胞划痕愈合实验检测AP-2对癌细胞迁移是否有影响。实验结果表明,转录因子AP-2能够显著地诱导乳腺癌MDA-MB-23 1细胞凋亡,并抑制癌细胞集落的形成和癌细胞迁移。更多还原