心脏钠通道基因突变导致家族性心脏传导障碍及扩张性心肌病

【作者】 孙爱军； 王时俊； 贾剑国； 王克强； 邹云增； 葛均波；

【机构】 复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所；

【摘要】 心脏钠通道基因(cardiac sodium channelαsubunit,SCN5A)突变已发现与L-QT综合征、Brugada综合征及房室传导阻滞有关。本研究在一个中国3代人口的家系中,发现一个与房室传导阻滞和扩张性心肌病有关的新的SCN5A突变位点,并对其功能进行分析。方法:对家系16名成员进行病史询问、体格检查、做12导联心电图,采集静脉血标本,抽提基因组DNA。PCR扩增SCN5A编码区及相邻内含子序列,直接测序筛选基因突变位点。利用人类SCN5A正常序列质粒,根据前期筛选的致病基因突变序列,重组质粒,并经转化、扩增,分别得到SCN5A正常序列质粒及含有突变序列的重组质粒;记录钠电流,描记INa及其电流-电压关系曲线、INa稳态灭活曲线、IN a灭活后恢复曲线;用TUNEL,Hoechest法观察细胞凋亡。结果:家系中所有的4位患者均在30岁左右发病,由一度房室传导阻滞逐渐进展,其中有3位患者已发展为完全性房室传导阻滞,并伴心脏扩大和心力衰竭。有1位患者安置起搏器,该患者在安置起搏器9年后死于心力衰竭。我们对SCN5A的基因进行全长扫描,在20号外显子发生C-T突变,导致第1180密码子的氨基酸编码改变(A1180V),家系中30岁以上的正常人和200例正常对照无此突变。分别将野生型及A1180V突变型质粒转入稳定表达SCN5β亚基的HEK293细胞,在荧光显微镜下选取绿色发光细胞行全细胞钳制,发现A1180突变引起慢失活的恢复延迟,导致峰值钠电流呈频率依赖性下降;还引起明显的非失活内向钠电流增加,该钠电流可被河豚毒阻断。并且发现突变可导致缺氧引起的心肌细胞凋亡增多。临床研究显示家系突变携带者在运动后QRS显著延长,而QT间期亦有延长趋势。结论:SCN5A基因A1180V突变导致慢失活的恢复延迟及非失活钠电流增加,并致细胞凋亡增多,提示SCN5A基因突变可直接导致心肌损伤及扩心病发生。更多还原