铜绿假单胞菌对Calu-3细胞基础分泌及CFTR表达的影响

【作者】 金莉莉； 王秋雨；

【机构】 辽宁大学生命科学院；

【摘要】 气管上皮细胞形成紧密连接,起到天然屏障作用,其粘膜下腺向气管上皮细胞表面分泌一薄层粘液(ASL),ASL的粘度较低,是由粘蛋白分子、抗菌引子、水和离子等复合物构成,对侵入病原体的先天性防御、清除和对空气的湿润具有重要作用。吸入的病原体可被粘液捕获,在纤毛摆动的驱动下,在上皮细胞表面形成一薄层等渗液体,其内的抗菌因子溶菌酶、防御素、Cathelicidin、乳铁蛋白等可以杀死或抑制细菌生长,并可以作为趋化因子,引起炎症反应。气管上皮粘液(ASL)体积和成分依赖于表皮和粘膜下腺细胞的分泌和吸收活动,ASL分泌量不足或者纤毛驱动的运动不足,将导致呼吸系统感染和炎症出现。ASL的分泌生要依赖囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)。Calu-3细胞系被广泛用做人气管上皮腺体浆液细胞的模型。该细胞在顶部表达CFTR以及其它浆液细胞的典型标志分子,Calu-3单层培养细胞具有分泌溶菌酶、β-防御素-1和-2、Cathelicidin、乳铁蛋白等抗菌因子的特性。本研究采用Calu-3气液界面培养模型,使用铜绿假单胞菌应激Calu-3细胞游离面。研究结果显示铜绿假单胞菌应激可显著增加的该细胞基础分泌,与对照组相比,差异显著;Real-time PCR和Western blotting的研究结果显示铜绿假单胞菌应激,可增加Calu-3细胞CFTR和Cathelicidin的表达;使用CFTR抑制剂CFTRinhl72和GIyH-10l可抑制Calu-3基础分泌的增加和CFTR的表达。本研究结果为进一步阐明呼吸道免疫分子机制和相关疾病的预防及治疗奠定了理论基础。更多还原