人T/NK细胞系ZQNK-29的建立及其生物学特性研究

【作者】 钱丽娟； 顾琳慧； 凌志强； 杜灵彬； 牟瀚舟； 孙文勇； 孔祥鸣； 凌雨田； 姜志明； 毛伟敏；

【机构】 浙江省肿瘤医院肿瘤研究所；

【摘要】 目的:建立一株国人的自然杀伤细胞(natural killer cell NK)系,为NK细胞的基础和临床应用研究提供相关性模型。方法:抽取NK细胞高表达的淋巴瘤患者的外周血,经淋巴细胞分离及CD56阴性磁珠分选,将分选的细胞再用.EB病毒转化技术进行培养,使其永生化并获得了一株无限量增殖的新的免疫表型人T/NK来源的细胞系,定名为(ZQNK-29),并对该细胞系进行了相关的生物学特性研究。结果:细胞增殖旺盛,连续传代培养已2年以上,细胞经液氮冻存后复苏培养存活率为98%以上。经相关生物学指标检测显示:对数增殖期细胞倍增时间为35.6小时;细胞周期检测为二倍体细胞;染色体分析显示为46 XY;将细胞接种于裸鼠皮下未见肿块生长;流式细胞表型分析显示:细胞表面标志:HLA-DR、CD3、CD10等为阳性,CD56、CD19、CD34等为阴性,免疫组化分析显示:CD10、CD3、TIA-1等表达阳性,CD4、CD56、CD45等表达阴性。细胞经体外和裸鼠体内抗瘤活性实验,显示了明显的抗瘤活性。多次支原体检测均为阴性。结论:一株新的免疫表型人T/NK来源的细胞系被"功建立,定名为(ZQNK-29),经体内外的抗肿瘤初步实验,显示了明显的抗瘤活性,为深入进行NK细胞的基础和临床应用研究提供了较好的体外实验模型。更多还原