Slit2/Robo1信号在鸡胚早期神经管和体节发育中的作用

【作者】 王广； 李艳； 马征来； 雷健； 王丽京； 耿建国； 杨雪松；

【机构】 暨南大学再生医学教育部重点实验室医学院组织与胚胎学系； 广东药学院血管生物学实验室；

【摘要】 原肠胚的末期,中线两侧的神经褶在背部中线处合并形成中枢神经系统的原基——神经管;在神经管两侧分节排列的中胚层组织团块我们称之为体节,是骨骼、肌肉、皮肤和尿殖器官(泌尿、生殖器官)的发生来源;在由神经褶愈合为神经管的过程中,神经褶边缘与表面外胚层相延续的部分神经外胚层细胞游离出来,形成左右两条与神经管平行的细胞索即为神经嵴,我们推测神经嵴细胞的迁移会影响体节的分化(生皮肌节和生骨节)。Robol作为Slit2的受体最早在果蝇体内发现具有轴突导向作用,Robol在鸡胚早期神经管闭合之前就已经有了表达,因此Slit2/Robol对鸡胚早期神经管闭合、神经嵴细胞迁移及体节分化方面的作用是值得我们深入研究的。我们采用显微注射法将pEGFP-N1或者Robol-shRNA-GFP质粒注射入HH10期胚胎神经管内,活体胚胎细胞电穿孔方法转染胚胎半侧神经管,以另一侧神经管为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光方法观察转染10h后神经管的发育和神经嵴绌胞迁移至体节的情况。我们发现降调Robol侧神经管发育较正常对照侧异常,同时发现Slug表达和神经嵴细胞迁移至体节路线发生改变,随后我们进一步观察了N-Cadherin在神经管上的表达情况,发现降调Robol后N-Cadherin的表达增强了。我们推测Slit2/Robol信号直接或间接的调节Slug或N-Cadherin的表达来影响上皮细胞向间充质绌胞转化(EMT)过程,从而抑制神经嵴细胞背侧的迁移,其具体机制我们还在继续研究之中。更多还原