丁酸钠对猪体细胞克隆胚胎重编程及组蛋白乙酰化的影响

【作者】 刘丽梅； 高飞； 张鹏； 安培培； 宋光启； 汤黎娜； 唐博； 李子义；

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室； 北华大学；

【摘要】 目的:研究去乙酰基酶抑制剂丁酸钠在克隆胚胎激活后对克隆胚胎组蛋白乙酰化水平及发育能力的影响。以探讨组蛋白乙酰化在克隆胚胎激活后核内染色质重编程过程中所发挥的作用。方法:猪卵丘一卵母细胞复合体(COCs)取自2～6mm卵泡。在体视显微镜下捡取具有完整三层以上卵丘细胞和均匀细胞质的COCs,39℃、5%CO2培养44小时。常规体细胞克隆操作及体外授精,重构胚激活后分别用1.0mM丁酸钠作用0h、6h、12h,并培养至第七天,计数囊胚率与卵裂率。细胞免疫染色检测体外授精胚胎,体细胞克隆胚胎及丁酸钠处理的体细胞克隆胚胎组蛋白乙酰化水平。结果:1.0 mM丁酸钠在重构胚激活后作用12 h能显著提高克隆胚胎的囊胚率(24.88±2.09 vs 13.15±3.07,p<0.05);且处理组2-cell胚胎及囊胚的组蛋白H3K14的乙酰化水平显著提高;克隆胚胎处理组组蛋白H3K14乙酰化水平与体外授精胚胎的水平更为接近。结论:克隆胚胎激活后1.0mM丁酸钠处理12h可以改变克克隆胚胎组蛋白H3K14乙酰化水平表达模式从而促进猪体细胞克隆胚胎植入前的发育。更多还原