猪圆环病毒2型与猪细小病毒共感染对仔猪的致病性

【作者】 杨芳； 陈立功； 宋勤叶； 李艳琴； 刘祥义； 张振红； 李楠；

【机构】 河北农业大学 河北省兽用生物制品研究中心；

【摘要】 猪圆环病毒2型（porcine circovirus type2,PCV2）引起的猪圆环病毒相关疾病（PCV2-associateddiseases,PCVAD）是危害当今世界养猪生产的重要免疫抑制性传染病之一。而猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）是PCVAD发病的重要协同致病因子。本研究通过分析PCV2与PPV共感染仔猪的临床症状、病理学变化、PCV2与PPV的组织分布以及外周血淋巴细胞亚群含量的变化,以期阐明PCV2与PPV共感染对仔猪的协同致病作用,为进一步揭示PCV2的致病机制奠定基础。将48头35 d健康仔猪随机分为PCV2感染组、PPV感染组、PCV2/PPV感染组和空白对照组,每组12头,分别经口鼻路径接种病毒。PCV2感染组接种PCV2 SD/2008株细胞毒(10^5.61TCID⁵⁰/0.1mL),3 mL/头;PPV感染组接种PPV7909株细胞毒(10^6.69TCID₅₀/0.1mL),3 mL/头;PCV2/PPV感染组接种3 mL,PCV2 SD/2008株和3 mL PPV7909株的混合液;对照组经相同途径接种3 mL细胞维持液。感染后第4-5周PCV2感染组和PCV2/PPV感染组仔猪的周平均增重显著低于PPV感染组与空白对照组（P<0.05）,PCV2/PPV感染组的周增重低于PCV2感染组。PCV2感染猪和PCV2/PPV共感染猪均出现由单核/巨噬细胞、多核巨细胞和嗜酸性粒细胞浸润引起的间质性肺炎、肝炎、肾炎和淋巴结炎症,以及淋巴组织内淋巴细胞缺失等PCV2引起的典型病理变化。与PCV2感染猪相比,共感染猪的肉眼病变和显微病变均较严重,而且病变出现比率较高。上述结果表明PPV感染对PCV2的致病作用具有协同作用。感染后3、7、14、35 d（dpi）,应用免疫组化技术检测组织中PCV2和PPV抗原的分布。结果表明,PCV2/PPV感染组猪的肺、肝、脾、肾、淋巴结、小肠等多种组织中的PCV2、PPV抗原信号数量与强度均高于PCV2或PPV单独感染猪,而且PCV2/PPV感染组淋巴结内的PCV2阳性信号的检出时间较早。此结果提示,PPV与PCV2共感染对其在部分组织中的增殖具有相互促进作用。感染14 d后,PCV2/PPV共感染猪血清中的PCV2或PPV特异性抗体分别比PCV2或PPV单独感染猪的相应抗体水平高,表明PCV2/PPV共感染可导致机体血清特异性IgG水平升高。3、7、14和35 dpi,应用流式细胞术测定各组仔猪外周血淋巴细胞中CD21⁺MHC-I⁺、CD21⁺MHC-Ⅱ⁺、CD3⁺CD4⁺CD8-、CD3⁺CD4^-CD8⁺、CD3⁺CD4⁺CD8⁺、CD3⁺CD4⁺CD25⁺、CD4⁺CD8⁺CD45RA⁺、CD3⁺CD4-CD8^-和NK等细胞亚群的动态变化,分析PCV2/PPV共感染对外周血免疫细胞含量的影响。结果显示,PCV2/PPV共感染可以引起CD21⁺MHC-Ⅰ和CD21⁺MHC-Ⅱ⁺成熟B细胞含量初期升高,后期下降,造成CD3⁺CD4⁺CD25⁺调节性T细胞含量升高;导致CD4⁺CD8⁺CD45RA⁺效应性T细胞持续下降,以及CD3⁺CD4^-CD8⁺杀伤性T细胞、CD3⁺CD4⁺CD8⁺、CD3⁺CD4^-CD8^-双阴性T细胞和CD3^-CD4^-CD8⁺NK细胞含量不同程度的降低。提示PPV/PCV2共感染可能上调了机体的免疫抑制性调节功能,使体液免疫功能相对增强,而特异性和非特性细胞免疫功能则下降,最终导致机体免疫功能抑制、体液一细胞免疫应答之间失衡。综上所述,本研究结果表明PPV通过促进PCV2在组织中的增殖、加剧机体免疫功能抑制和紊乱,发挥其对PCV2的协同致病作用。更多还原