E.maxima ADF基因亚单位疫苗与核酸疫苗的免疫保护性研究

【作者】 刘兆辉； 张西臣； 宫鹏涛； 杨举； 李赫； 张国才； 李建华；

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院；

【摘要】 为探讨ADF基因对巨型艾美尔球虫感染的免疫保护作用,本研究扩增出ADF基因序列,将其克隆入原核表达载体并表达出重组ADF蛋白,同时将巨型艾美尔球虫ADF基因与真核表达载体pVAX1相连,构建真核表达载体,并将重组真核表达质粒转染Hela细胞,验证其在真核细胞中的表达;将重组ADF亚单位疫苗与核酸疫苗分别免疫雏鸡,检测其对动物的免疫保护力。实验结果表明,扩增出巨型艾美尔球虫的ADF基因,其ORF大小357bp,经Blast比对显示与柔嫩艾美尔球虫ADF基因的同源性为99%,重组质粒转化DE3,并表达出17KDa的融合蛋白,重组质粒转染Hela细胞后,经间接免疫荧光实验后发现重组质粒可以在Hela细胞中表达;将巨型艾美尔球虫亚单位疫苗通过口服和皮下注射雏鸡后发现,可激发机体的细胞免疫,其中口服组效果优于皮下注射组,其抗球虫指数达到162.7,将核酸疫苗肌肉注射免疫雏鸡后,结果表明可诱导机体产生较高水平的细胞免疫应答,其抗球虫指数为178.2。本研究为预防鸡球虫病奠定了基础。更多还原