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TGEV和PEDV多重RT-PCR检测方法的建立及其细胞分离培养研究
【机构】 广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室； 华南农业大学生命科学学院；
【摘要】 根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的ORF2(S基因)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777株的ORF6(N基因)核酸序列,经DNAsis2.0比较分析,分别筛选出TGEVS基因和PEDVN基因相对保守区,利用PrimerPremier5.0软件设计两对引物。多重RT-PCR得到与预期大小相一致的约858bp和511bp的产物,特异性试验表明,多重RT-PCR不与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒和猪轮状病毒反应,特异性良好;敏感性试验表明多重RT-PCR能检测10TCID50/mL疫苗毒。将猪传染性胃肠炎、轮状病毒二联活疫苗和疑似腹泻猪粪便分别在ST细胞和Vero-E6细胞上进行增殖,经RT-PCR和金标试纸条检测,分别盲传5代、10后成功分离出TGEV和PEDV病毒。
【基金】 十一五国家科技支撑计划项目(2008BAD96B07);广东省科技计划项目(2009B020307006)资助
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会
- 【会议时间】2010-10-12
- 【会议地点】中国河南郑州
- 【分类号】S858.28
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会、解放军军事医学科学院军事兽医研究所、河南省畜牧局、河南省畜牧兽医学会动物传染病学分会