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猪繁殖与呼吸综合征病毒JL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达系统的建立
【机构】 吉林农业大学动物科技学院预防兽医学系； 吉林农业科技学院； 吉林大学畜牧兽医学院动物医学系；
【摘要】 目的利用pEGFP-N1载体构建了含有PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达载体pEGFP-IL18-GP5。方法采用RT-PCR方法扩增了JL/07/SW毒株GP5基因和猪IL-18基因。将该基因与真核表达载体pEGFP-N1连接,克隆获得重组质粒pEGFP-IL18-GP5。将获得重组质粒转染MACR-145细胞,检测目的蛋白的表达情况。结果 RT-PCR分别扩增出GP5基因和IL-18基因,大小与预期一致;通过荧光显微镜观察、SDS-PAGE和Westernblot试验证明GP5基因和IL-18基因在MACR-145细胞中成功表达。结论成功构建含有PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达载体pEGFP-IL18-GP5,为研究基于以EGFP为报告基因的IL18-GP5为靶蛋白的核酸疫苗以及细胞因子对PRRS核酸疫苗免疫效果的影响奠定了实验基础。
【关键词】 猪繁殖与呼吸障碍综合征；
GP5基因；
IL-18基因；
真核表达；
【基金】 广东省科技攻关重大项目(2008A020100020)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会
- 【会议时间】2010-10-12
- 【会议地点】中国河南郑州
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会、解放军军事医学科学院军事兽医研究所、河南省畜牧局、河南省畜牧兽医学会动物传染病学分会