节点文献
牛α-IFN及口蹄疫病毒P12A3C组合基因双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室；
【摘要】 从口蹄疫病毒AsiaⅠ/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以:pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12h,按100TCID50/0.1mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供了前期基础。
【关键词】 口蹄疫病毒；
P12A基因；
3C基因；
α-干扰素；
pBudCE4.1载体；
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会（第三届中国兽药大会学术论坛）论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会（第三届中国兽药大会学术论坛）
- 【会议时间】2010-09-01
- 【会议地点】中国湖南长沙
- 【分类号】S858.23
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会