106株宠物源性大肠杆菌生物被膜表型和耐药谱型的分析

【作者】 陈朝喜； 廖晓萍； 朱恒乾； 高豪； 梁肖霞； 蒿子枫； 卢佳； 陈伟清； 刘雅红；

【机构】 华南农业大学兽医学院兽医药理与毒理学教研室； 西南民族大学生命科学与技术学院；

【摘要】 【目的】对106株宠物源性大肠杆菌生物被膜形成进行定性和定量研究,同时测定其对兽医临床常用15种抗菌药物的最小抑菌浓度,分析和研究抗生素压力下大肠杆菌耐药谱型与生物被膜表型之间的关系。【方法】采用改良结晶紫半定量方法,快速银染和扫描电镜等定性方法对生物被膜进行相关性分析;同时采用NCCLS标准方法对106株大肠杆菌进行恩诺沙星,阿米卡星,头孢噻呋等15种宠物医院抗菌药物敏感性试验,采用Whonet5.3软件对实验数据进行统计,分析大肠杆菌生物被膜表型和耐药谱型之间的关系。【结果】106株宠物源性大肠杆菌分为强成膜能力、中等成膜能力、弱成膜能力和无成膜能力四不同的成膜能力表型,分别占3.77%、33.96%、59.43%和2.83%,大多数的大肠杆菌具有中等或弱的成膜能力。快速银染鉴定和扫描电镜观察结果表明,大肠杆菌形成生物被膜后,常以大量细菌聚集在一起,其中大量细菌包裹在其自身分泌的胞外基质中,形成一种浮游细菌和生物被膜细菌共同分布于同一生存空间,而且有组织成规模的完全不同于游离菌的特殊结构和生长方式。MIC结果表明不同成膜能力菌株对15种抗菌药物表现出不同的耐药镨型:在强成膜能力组,除了阿米卡星,左旋氧氟沙星,利福平,多粘菌素和氟苯尼考的耐药率较低外,其余10种抗菌药物对大肠杆菌表现出较高的耐药率(25%～100%),且耐药谱型以卡那霉素+多西环素+头孢噻呋+阿齐霉素+庆大霉素+头孢曲松为主;中等成膜能力组和弱成膜能力组的各种药物的耐药水平表现出相似的规律,耐药率主要集中在20%～50%之间,耐药谱型以多西环素+头孢噻呋+利福平为主;无成膜能力组除了利福平耐药水平较高外,其余药物的耐药水平都比较低,均在33%以下,耐药谱型以利福平+头孢曲松+头孢噻肟为主。【结论】试验结果表明,快速银染法能够对大肠杆菌生物被膜进行鉴定,和扫描电镜有很好的相关性;抗生素压力下,生物被膜的形成与耐药谱型之间存在着不同程度的相关性。造成多种抗菌药物对大肠杆菌造成多种不同的生物被膜能力表型的原因与多种抗菌药物相互影响有很大的直接关系。更多还原