福氏志贺菌2a AcrA蛋白的表达、纯化及初步结晶

【作者】 魏小娟； 张继瑜； 王松泰； 黄娇娇； 李剑勇； 周绪正； 牛建荣； 李金善； 李冰；

【机构】 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药重点开放实验室；

【摘要】 【目的】对福氏志贺菌2a血清型的AcrA蛋白进行表达和初步结晶,为之后的结构解析打下基础。【方法】采用PCR法扩增了福氏志贺菌2a血清型的acrA基因,将其克隆至表达载体pET-30a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)以获得重组蛋白,将重组蛋白进行纯化并浓缩至10mg/mL,采用悬滴气相扩散法培养AcrA蛋白质晶体。【结果与结论】通过系统筛选和优化结晶条件获得了蛋白质晶体。更多还原