金荞麦抗菌及免疫调节活性及其血清药理学研究

【作者】 乔红杰； 王贵平； 孙永学；

【机构】 华南农业大学兽医药理研究室； 广东省农科院兽医研究所；

【摘要】 【目的】金荞麦(Fagopyrum Dibotrys)是我国民间的一种常用中草药,含有大量的黄酮类化含物,在古代已用于治疗多种疾病。本文主要研究了金荞麦根不同提取物的抗菌和免疫作用,并用血清药理学的方法探讨了金荞麦根含药血清的抗菌及免疫调节活性。旨在为其在兽医临床上的应用提供依据。【方法】(1)金荞麦根不同溶剂提取物的制备:采用索氏提取法,用水和不同浓度的乙醇对金荞麦根中的有效成分进行了提取,并以芦丁为标准品、硝酸铝-亚硝酸钠为显色剂,采用紫外分光光度法对金荞麦根各提取物中总黄酮类成分进行了含量测定:(2)采用试管法测定金荞麦根各提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和鸡沙门氏菌的体外抑菌活性。为评价金荞麦根提取物的免疫调节活性,将各提取物按照不同的浓度加入到培养的鸡脾淋巴细胞中,培养48h后,用MTT法测定淋巴细胞增值的变化:(3)应用60%的乙醇根提取物制备含药血清,首先通过预实验确定最佳的含药血清制备方案,包括给药剂量、给药方案和采血时间点的确定。设立3个剂量组(高40g生药/kg/d、中24g生药/kg/d、低6g生药/kg/d)和对照组(生理盐水),每天给药2次,连续给药10d,末次给药后40、80、120和180min分别翅下静脉采血,无菌分离血清,经56℃、30min灭活备用。观察血清不同添加量对鸡脾淋巴细胞增值活性的影响等指标确定了体外试验系统的血清最佳添加量;(4)为探讨含药血清对机体免疫调节活性的影响,用含药血清进行鸡脾淋巴细胞增值活性和鸡外周血T细胞分泌IL-2、IFN-γ活性免疫功能检测:(5)运用血清药理学的方法测定了含药血清的抗菌活性,采用纸片扩散法测定了含药血清对各受试菌的体外抗菌活性。【结果】金荞麦根不同溶剂提取物的制备中,60%的乙醇根提取液中总黄酮的含量最高,60%的乙醇根提取液亦对各受试菌的抗菌活性最强。同时60%的乙醇根提取液免疫调节活性为最好。金桥麦根含药血清对鸡脾淋巴细胞增值活性的影响呈明显的时-效及量-效关系,其中以中剂量组120min时相含药血清对鸡脾淋巴细胞的增值活性为最高。60%的金荞麦根乙醇提取物在灌胃40-180min时相的含药血清有免疫增强作用,但含药血清对各受试菌无体外抗菌活性。【结论】金荞麦根的60%的乙醇根提取液中总黄酮的含量最高,对各受试菌的抗菌活性和对鸡脾淋巴细胞的增值活性为最强。金荞麦根含药血清对鸡脾淋巴细胞增值活性和对鸡外周血T淋巴细胞IL-2mRNA、IFN-γmRNA的表达的影响呈明显的的时-效和量-效关系。更多还原