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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达
【作者】 廖俊伟； 尹秀凤； 刘大伟； 毛火云； 胡来根； 张小飞；
【机构】 南京天邦生物科技有限公司； 安徽农业大学动物科技学院；
【摘要】 根据DHV-Ⅰ基因组序列设计并合成一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ（A66株）VP1基因.用限制性内切酶EcoRⅠ/HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ,在T4 DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1.经PCR、双酶切及测序鉴定后将其转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10bac中,蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9。获得重组杆状病毒rvBac-VP1.SDS-PAGE分析表明,VP1基因在昆虫细胞中获得表达,表达产物分子量约为27KDa.Western-blot检测表明,表达产物能与抗DHV-Ⅰ阳性血清发生反应,具有良好的反应原性.
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2009-09-01
- 【会议地点】中国广西南宁
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会(Branch of Animal Infectious Diseases,CAAV)