节点文献
三种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性试验
【作者】 李薇； 余兴龙； 罗维； 白霞； 李润成； 黎满香； 葛猛； 王亚； 向卫军； 李晶；
【机构】 湖南农业大学动物医学院；
【摘要】 本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)三个亚群(1A、1B和1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8、P0、P4-1.将重组质粒大量提取后,用SacⅡ切出1767bp的PCV-2全基因组,在体外用T4 DNA连接酶使其自身连接环化。用脂质体将连接产物转染无PCV-1污染的PK-15细胞,并按常规病毒培养方法传代,第5代细胞培养物用间接免疫荧光试验(IFA)及PCR方法检测,并同时腹腔接种小鼠。结果:IFA和PCR实验均证实已经获得子代PCV-2病毒,并可在接种小鼠的血液中检测到PCV-2的基因组DNA。表明本试验构建的自身环化的PCV-2全基因组DNA在体内、外均具有感染性,为研究PCV-2的不同基因群毒株与毒力之间的关系打下了基础。
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（上册）
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2009-09-01
- 【会议地点】中国广西南宁
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会(Branch of Animal Infectious Diseases,CAAV)