节点文献
猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF5基因的克隆与原核表达
【作者】 梁望旺； 伍锐； 杨克礼； 刘泽文； 熊忠良； 段正赢； 邓均华； 徐涤平；
【机构】 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所；
【摘要】 本研究采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株(HBKM2)的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5(nsORF5),并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:克隆的nsORF5基因与谷胱甘肤转移酶(GST)基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-nsGP5分子量约为43KDa,并具有反应活性.本研究为进一步研究PRRSV GP5蛋白的功能及新型疫苗、血清学诊断方法的研制奠定了基础.
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)；
囊膜蛋白(GP5)；
克隆；
原核表达；
【基金】 国家科技支撑计划(2006BAD06A18);湖北省农业科技创新中心资助项目(2007-620-001-03)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（上册）
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2009-09-01
- 【会议地点】中国广西南宁
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会(Branch of Animal Infectious Diseases,CAAV)