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巨型艾美耳球虫配子体蛋白GAM56基因的克隆、表达及应用的初步研究
【机构】 中国农业大学动物医学院；
【摘要】 GAM56是Eimeria maxima的配子体蛋白,从配子体阶段收集的天然蛋白具有较好的母源免疫保护作用。本研究克隆了Eimeira maxima扬州株的配子体蛋白基因Gam56,将其与pGEX-6p-1表达载体连接,构建原核表达质粒,用BL21受体菌表达GST-GAM56融合蛋白。经SDS-PAGE及Western Blot检测,成功表达出GSTGAM56融合蛋白。优化表达条件,获得大量GST-GAM56融合蛋白,一部分用GST-3C蛋白酶切除GST标签,分别获得大量纯化的GST-GAM56融合蛋白和GAM56蛋白。Western boltting检测两蛋白均能被E.maxima阳性血清识别。分别用纯化的GST-GAM56和GAM56蛋白分别免疫处于产蛋高峰期的白来航母鸡,检测免后母鸡血清抗体和卵黄抗体水平及抗体持续存在时间,同时进行子代雏鸡的抗球虫免疫保护和球虫病的治疗效果评价。以综合评价E.maixma的重组Gam56的母源免疫效果。
【关键词】 Eimeria maxima；
Gam56；
母源抗体；
母源免疫；
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会
- 【会议时间】2009-08-01
- 【会议地点】中国甘肃兰州
- 【分类号】S852.723
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会