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羊传染性脓疱病毒长春分离株的分离鉴定及其B2L、F1L基因DNA疫苗表达载体的构建
Identification of Orf virus(ORFV) of Changchun isolate and construction of B2L gene and F1L gene from Orf virus DNA vaccine expressing plasmid
【作者】 赵魁； 贺文琦； 宋德光； 张冰冰； 李超； 高丰；
【机构】 吉林大学畜牧兽医学院； 吉林农业大学动物科技学院；
【摘要】 通过病理组织学观察、免疫组化、间接免疫荧光(IFA)、病毒分离、电镜观察、PCR等方法对长春市某羊场3～6月龄羔羊出现"口疮"症状的病因进行研究分析,经系统鉴定后,证实该病毒株为羊传染性脓疱病毒(Orfvirus,ORFV),命名为ORFV-jl。利用PCR方法克隆出其主要免疫原性基因B2L和F1L,之后将它们分别定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点BamHⅠ和XhoⅠ之间,以及HindⅢ和EcoRⅠ之间,经PCR和酶切鉴定,构建出真核表达重组质粒pcDNA3.1-B2L和pcDNA3.1-F1L,之后通过脂质体介导法分别转染MDBK细胞,并用G418进行加压筛选,后经IFA和Western blot方法检测外源基因B2L、F1L的表达情况,结果得到预期大小的蛋白带,表明该重组质粒能够在哺乳动物细胞中较好地表达。
【关键词】 羊传染性脓疱病毒长春株；
分离鉴定；
B2L基因；
F1L基因；
DNA疫苗；
【基金】 吉林省科技发展计划重点项目(20080217)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会
- 【会议时间】2009-07-01
- 【会议地点】中国山东泰安
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会