猫杯状病毒衣壳蛋白多表位抗原的原核表达

【作者】 王延树； 向华； 郑翠玲； 严悌昆； 宣华；

【机构】 广东省农科院兽医研究所； 吉林大学畜牧兽医学院；

【摘要】 表达猫杯状病毒衣壳蛋白抗原表位并检测其免疫反应原性。应用RT-PCR技术从FCV病毒F81细胞培养物中提取病毒总RNA,克隆3’端保守区,再用特异PCR扩增目的基因,将其亚克隆到pET-28a载体,构建pET-FCV表达载体。经酶切,PCR,测序鉴定。将阳性重组表达质粒转化E.Coli BL-21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE及Western-blot检测。阳性重组表达质粒转化E.coli BL21(DE3)后,经诱导表达了目的蛋白,表达量占菌体总蛋白的40%。Western blot检测表达蛋白可与FCV阳性血清发生反应。已成功表达了猫杯状病毒衣壳蛋白抗原表位,且具有良好的免疫反应原性。更多还原