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狂犬病毒ERA株糖蛋白在小鼠骨髓瘤细胞中的表达研究
【作者】 侯小强； 夏咸柱； 高玉伟； 杨松涛； 薛琳； 高明华；
【机构】 解放军军事医学科学院,军事兽医研究所； 吉林大学畜牧兽医学院；
【摘要】 根据狂犬病毒糖蛋白(G蛋白)免疫活性及免疫特性,参考有关文献及用蛋白质亲疏水性分析程序分析,选取狂犬病毒ERA株糖蛋白膜外区的基因片段设计扩增引物,在上、下游引物中引入BamH I和EcoRI限制性酶切位点,并在下游引物5’端添加了His-tag。用分子克隆的方法将目的基因插入真核表达载体质粒pcDNA3.1(+)中,构建表达载体pcDNA3.1-RG,进行核酸序列测定。用真核表达载体pcDNA3.1-RG,通过脂质体介导法转染小鼠SP2/0和NS0骨髓瘤细胞,利用夹心ELISA方法和荧光抗体方法进行检测。结果检测到重组真核表达质粒pcDNA3.1-RG在SP2/0和NS0骨髓瘤细胞中均进行了瞬时表达。此方法的建立为研究大量分泌表达狂犬病毒ERA株糖蛋白奠定了基础,也为研发防治狂犬病的新型免疫制剂和诊断方法打下良好的基础。
【基金】 黑龙江省博士后资助经费(LBH-Z05213);中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金资助(2006-A-02)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
- 【会议时间】2007-09-20
- 【会议地点】中国江西井冈山
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】解放军军事医学科学院军事兽医研究所、江西省畜牧兽医局