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猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆及在293T细胞中表达

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【作者】 党占国夏平安崔保安张红英尹彦涛王建举柴春霞陈溥言

【机构】 河南农业大学南京农业大学

【摘要】 根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株ORF5基因序列设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增PRRSV Hn/06-1分离株ORF5基因片段。将扩增片段克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,测序后用DNAstar作序列分析。构建的PcDNA-ORF5重组质粒瞬时转染293T细胞,48h后用Western-blot检测,证明ORF5蛋白在293T细胞中获得了表达,可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。该研究结果将为进一步构建PRRSV假型病毒,研究PRRSV进入细胞的发病机制奠定基础。

【关键词】 PRRSVORF5基因克隆真核表达
【基金】 中国博士后基金项目(20060390944)
  • 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会论文集
  • 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
  • 【会议时间】2007-09-20
  • 【会议地点】中国江西井冈山
  • 【分类号】S852.65
  • 【主办单位】解放军军事医学科学院军事兽医研究所、江西省畜牧兽医局
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