巢式PCR检测无乳链球菌16S rRNA方法的建立与应用

【作者】 贾玉萍； 周东顺； 万仁忠； 刘文强； 胡敬东； 赵宏坤；

【机构】 山东农业大学动科院； 山东省实验动物中心；

【摘要】 无乳链球菌(Streptococcus.agalactiae)引起的奶牛乳房炎主要表现为隐性型,往往需要通过实验室检查才能确诊。本研究建立了一种特异、敏感和快速的套式PCR方法用于检测奶样中的无乳链球菌。利用链球菌属(Streptococcus)16SrRNA基因的保守区设计通用引物作为链球菌属的阳性控制,在保守区内的可变区设计无乳链球菌特异的引物。研究结果表明,通过奶样中无乳链球菌的增菌培养,简便、快速提取DNA和特异性PCR反应,可以检测到奶样中1CFU/mL的无乳链球菌。本方法可以用作牛群中无乳链球菌感染的早期流行病学调查,为预防控制无乳链球菌在牛群中迅速传播的提供了一种有效的方法。更多还原