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单抗阻断ELISA检测口蹄疫病毒NSP抗体方法建立
【作者】 王传彬； 田新生； 王宏伟； 孙明； 曹振； 遇秀玲； 金萍； 陈西钊； 田克恭；
【机构】 农业部兽医诊断中心；
【摘要】 目的建立检测口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)抗体的单抗阻断ELISA方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础。方法用亲和层析法纯化抗FMDNSP单克隆抗体,并标以辣根过氧化物酶,再以FMDNSP抗原包被微量反应板,经方阵试验优化单抗阻断ELISA的反应体系。用该方法检测FMD阴性群、感染群体和灭活疫苗免疫群体的血清样本,确定了试验体系的临界值。结果纯化后单抗有良好的反应活性,标记后酶标单抗效价为64000;确立的单抗阻断ELISA反应体系,能有效鉴别FMD、感染群体和灭活疫苗免疫群体,可以检测O、A、C、和亚洲I型血清抗体,并能同时检测牛、羊、猪和豚鼠等动物血清。结论初步建立了检测牛、羊、猪血清FMVNSP抗体的单抗阻断ELISA方法,可作为进一步研制试剂盒和进行应用试验的基础。
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
- 【会议时间】2005-09-24
- 【会议地点】中国四川雅安
- 【分类号】S855.3
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会、四川农业大学